Die hier beschriebene Methode ermöglicht die Produktion
großer Mengen reiner Antikörper, die nur mit einer einzigen antigenen
Determinante (Epitop) reagieren. Die in dem Schema gezeigte Anwendung ist die
Herstellung monoklonaler Antikörper zum Nachweis von humanem Choriogonadotropin
(HCG), einem Hormon in Blut und Urin von Schwangeren. Als erstes wird eine Maus
mit dem Antigen von Interesse (in diesem Fall HCG) dreimal in Abständen
immunisiert. Nach Entwicklung einer starken Immunantwort – nach etwa 2
Monaten – wird die Maus getötet und die Milz entnommen. Unter den
Milzzellen sind neben B-Lymphozyten aller möglichen Spezifitäten auch
viele verschiedene HCG-reaktive B-Zellen. Diese normalen Lymphocyten kann man
durch Fusion mit Myelomzellen, die als Tumorzellen unbegrenzt wachsen, immortalisieren.
Die in diesem Verfahren verwendeten Myelomzellen sind Mutanten mit einem genetischen
Defekt; sie überleben nicht, wenn ihnen ein bestimmter Nährstoff im
Medium fehlt. Dies ist ein wichtiger Punkt, denn er erlaubt eine Selektion der
Zellen, die korrekt fusionieren.
Die Milz-Lymphocyten und die Myelomzellen werden auf eine Weise gemischt, die
ihre Fusion fördert. Manche der Zellen fusionieren und werden zu Hybridomen,
andere fusionieren nicht oder aber mit einem gleichartigen Partner. Alle diese
Zellen kommen dann in Kulturschalen mit dem Mangelmedium. Die verbliebenen Myelomzellen
sterben ab. Normale Lymphocyten überleben zunächst, aber nur für
wenige Tage, denn sie sind nicht immortalisiert. Nur die Hybridomzellen überleben
dauerhaft, denn das Lymphocytengenom stellt das Wachstumsgen, und das Myelomgenom
stellt das Immortalitätsgen.
Nun werden die überlebenden Zellen mehrfach stark verdünnt und getrennt
kultiviert und so sichergestellt, daß man es mit reinen Klonen zu tun
hat. Dabei wird getestet, welche Klone Antikörper gegen HCG produzieren.
Positive Klone können dann in großem Maßstab gezogen werde.
Monoklonale Antikörper gegen HCG sind eine empfindliche und spezifische
Sonde zum Nachweis von HCG im Blut oder Urin von Schwangeren. Da HCG ein Produkt
des Embryos ist, zeigt eine positive Reaktion des Antikörpers zuverlässig
eine Schwangerschaft an.